实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药效分析等。

STTM是人工合成的一段短串联靶标模拟物，中间有一段48nt左右的特定核昔酸序列，两端分别有目标miRNA结合位点，每段miRNA结合序列包括3个非互补碱基（CTA），该序列能与目标miRNA结合形成非完全互补双链，从而有效地阻止miRNA与目的基因结合，使miRNA沉默，使目的基因表达量升高（Yan etaL, 2012）。 ? ?STTM技术是研究体内miRNA的有效工具，使miRNA的沉默，使miRNA的靶基因表达量升高,该技术已被广泛应用在拟南芥、水稻、番茄、大豆等miRNA的功能研究（Zhang et al., 2017）

拟南芥（Arabidopsis thaliana）与油菜、萝卜、卷心菜等同为十字花科植物，又名鼠耳芥、阿拉伯芥、阿拉伯草，广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究，是一种典型的模式植物。拟南芥植株较小、生长周期短（从发芽到开花约4-6周）、结实多（每株可产生数干粒种子）、具有明显的形态特征（利于突变体表型的观察）、基因组较小、遗传操作简便。经过不断的实践，浸花法（floral tip）已成为拟南芥遗传转化最常用的方法。

CRISPR-Cas9是继ZFN、TALENs等基因编辑技术推出后的第三代基因编辑技术，短短几年内,CRISPR-Cas9技术风靡全球, 成为现有基因编辑和基因修饰里面效率最高、最简便、成本最低、最容易上手的技术之一，成为当今最主流的基因编辑系统。CRISPR-Cas9技术包含两种重要的组分，一种是行使DNA双链切割功能的Cas9蛋白，而另一种则是具有导向功能的gRNA（guide RNA）。CRISPR-Cas9技术利用一段与靶序列互补的gRNA引导Cas9核酸酶对特异靶向DNA进行识别和切割，造成DNA的双链或单链断裂，然后，细胞会利用自身具备的两种DNA修复机制对断裂的DNA进行修复，即非同源性末端接合（Non-homologous end joining, NHEJ）或同源介导的修复（Homology-directed repair, HDR）。